紅細胞裂解液 BL503A

紅細胞裂解液 BL503A 現(xiàn)貨

紅細胞裂解液 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 BL503A 紅細胞裂解液 120 ml 產(chǎn)品簡介： 紅細胞裂解液是一種用于從人或鼠等的血液或組織樣品中裂解并去除無細胞核紅細胞 的溶液。經(jīng)過優(yōu)化配方，在裂解紅細胞的同時幾乎不損傷淋巴細胞(lymphocyte)或其它有細 胞核的細胞。主要有效成分為氯化銨。不適用于有細胞核紅細胞的裂解，例如鳥或禽類的紅 細胞。經(jīng)過無菌處理，處理過的血液或組織細胞樣品可以用于后續(xù)的原代培養(yǎng)、細胞融合以 及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測。 使用說明： 對于組織細胞樣品： 1、新鮮組織經(jīng)過膠原酶或胰酶等消化處理，通過適當(dāng)方法分散成細胞懸液，離心棄上 清。 2、加入 3-5 倍細胞體積的紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解 1-2 分鐘。例如細胞沉 淀的體積為 1ml，則加入 3-5ml 的紅細胞裂解液。本步驟在室溫或 4 度操作均可。 3、400-500g 離心 5 分鐘，棄紅色上清。4℃離心效果更佳。 4、如果發(fā)現(xiàn)紅細胞裂解不*，可以重復(fù)上述步驟 2 和步驟 3 一次。通常極微量的紅 細胞不會影響后續(xù)的一些檢測。 5、洗滌 1-2 次：加入適量 PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，重懸沉淀，400-500g 離心 2-3 分鐘，棄上清。可再重復(fù) 1 次，共洗滌 1-2 次。洗滌液的用量通常應(yīng)至少為細胞沉 淀體積的 5 倍。4℃離心效果更佳。 6、根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細胞沉淀后即可進行計數(shù)等后續(xù)實驗。 對于組織細胞樣品無需洗滌的快速操作步驟： 1、新鮮組織經(jīng)過膠原酶或胰酶等消化處理，通過適當(dāng)方法分散成細胞懸液，離心棄上 清。 2、對于 0.2ml 細胞沉淀加入 1ml 紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解 1-2 分鐘。本步 驟在室溫或 4 度操作均可。 3、加入 15-20ml PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，混勻。 4、400-500g 離心 5 分鐘，棄紅色上清。4℃離心效果更佳。 5、如果發(fā)現(xiàn)紅細胞裂解不*，可以重復(fù)上述步驟 2 和步驟 3 一次。通常極微量的紅 細胞不會影響后續(xù)的一些檢測。 6、根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細胞沉淀后即可進行計數(shù)等后續(xù)實驗。 說明：對于常規(guī)步驟，多一步洗滌過程中的離心，但可以節(jié)省洗滌液的用量，并且洗滌 效果也更好一些，同時不需要大體積的離心管。快速步驟少了一次離心，但洗滌效果略差一 些，同時需要大體積的離心管。 對于血液樣品： 1、取新鮮抗凝血，400-500g 離心 5 分鐘，離心棄上清。 2、加入 6-10 倍細胞體積的紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解 1-2 分鐘。例如細胞沉 淀的體積為 1ml，則加入 6-10ml 的紅細胞裂解液。本步驟在室溫或 4 度操作均可。注意： 對于鼠的血液，裂解 1-2 分鐘已經(jīng)足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至 4-5 分鐘，并 且裂解過程中宜適當(dāng)偶爾搖動以促進紅細胞裂解。 3、 400-500g 離心 5 分鐘，棄紅色上清。4℃離心效果更佳。 4、如果發(fā)現(xiàn)紅細胞裂解不*，可以重復(fù)上述步驟 2 和步驟 3 一次。通常極微量的紅 細胞不會影響后續(xù)的一些檢測。 5、洗滌 1-2 次：加入適量 PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，重懸沉淀，400-500g 離心 2-3 分鐘，棄上清。可再重復(fù) 1 次，共洗滌 1-2 次。洗滌液的用量通常應(yīng)至少為細胞沉 淀體積的 5 倍。4℃離心效果更佳。 6、根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細胞沉淀后即可進行計數(shù)等后續(xù)實驗。 注意：對于微量或少量的血液樣品，可在*步中不進行離心棄上清的操作，直接在第 二步中加入 10 倍血液體積的紅細胞裂解液，并在室溫或 4℃裂解 4-5 分鐘。對于鼠的血液， 裂解 4-5 分鐘已經(jīng)足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至 10 分鐘，但通常不宜超 過 15 分鐘，并且裂解過程中宜適當(dāng)偶爾搖動以促進紅細胞裂解。后續(xù)步驟相同。 對于血液樣品無需洗滌的快速操作步驟： 1、每 1ml 新鮮抗凝血中加入 10ml 紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解 4-5 分鐘。本步 驟在室溫或 4 度操作均可。注意：對于鼠的血液，裂解 4-5 分鐘已經(jīng)足夠，對于人的外周血， 宜延長裂解時間至 10 分鐘，但通常不宜超過 15 分鐘，并且裂解過程中宜適當(dāng)偶爾搖動以促進紅細胞裂解。 2、加入 20-30ml PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，混勻。 3、 400-500g 離心 5 分鐘，棄紅色上清。4℃離心效果更佳。 4、如果發(fā)現(xiàn)紅細胞裂解不*，可以重復(fù)上述步驟 2 和步驟 3 一次。通常極微量的紅 細胞不會影響后續(xù)的一些檢測。 5、根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細胞沉淀后即可進行計數(shù)等后續(xù)實驗。 注意：對于常規(guī)步驟，多一步洗滌過程的離心，但可以節(jié)省洗滌液的用量，并且洗滌效 果也更好一些，同時不需要大體積的離心管。快速步驟少了一次離心，但洗滌效果略差一些， 同時需要大體積的離心管。 注意事項： 1、本裂解液為無菌產(chǎn)品，請注意保持無菌，使用本產(chǎn)品時宜在超凈工作臺內(nèi)進行。 2、 如果經(jīng)過紅細胞裂解液處理后的樣品后續(xù)用于總 RNA 的提取，在處理細胞時不必使 用經(jīng)過 DEPC 處理過的溶液。 3、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 保存條件： 4℃保存，一年有效。室溫保存，3 個月有效。

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